首先要注意的是，正常情況下，雜交瘤不是絕對穩(wěn)定的，容易發(fā)生染色體丟失的情況，尤其是當(dāng)細胞移到新環(huán)境中生長，如從小孔擴大到大孔，或者復(fù)蘇操作時，更容易發(fā)生陽性變?yōu)殛幮浴５且灿幸恍┓椒ūM量減少陽性變?yōu)殛幮?。一般可以從這幾個方面加以注意：

　　1.盡量使細胞處在最佳的生長環(huán)境中。尤其是培養(yǎng)基不能長期不換，一般而言，當(dāng)細胞增長到一定密度時，培養(yǎng)基就開始變顏色，此時就要準備換培養(yǎng)基。除換培養(yǎng)基，同時應(yīng)該控制好細胞密度，可以吹走過多的細胞，使新加入的培養(yǎng)基不至于很快被消耗。

　　2.對于重要的細胞株，每一步都把陽性的細胞保種。

　　3.不要頻繁操作細胞，當(dāng)細胞生長密度不是很大時，不要頻繁操作，否則細胞容易出現(xiàn)死亡或者生長形態(tài)發(fā)生明顯變化。

　　4.對于傳代次數(shù)較多的細胞株需要經(jīng)常進行亞克隆，并將每一次的亞克隆株也作凍存。

　　5.當(dāng)細胞被支原體微生物污染，也會發(fā)生由陽性轉(zhuǎn)為陰性的情況。